核磁管在配置高質(zhì)量樣品時(shí)有哪些基本原則

　　核磁管帽子放在烘箱里烘干是非常不合適的，烘箱里高過常溫，帽子即使不變形，也會(huì)變得很硬，失去原有的軟彈性，非常不好用。是洗凈后擦干，再自然晾干。雖然是石英材質(zhì)，耐高溫，但是在烘干時(shí)，也不適宜溫度太高，我平時(shí)設(shè)定的溫度大概是五六十度。如果在高溫下長時(shí)間烘，不能說在使用時(shí)一定會(huì)對實(shí)驗(yàn)有所影響，只是會(huì)加大影響實(shí)驗(yàn)的可能性。比如說在旋轉(zhuǎn)時(shí)旋轉(zhuǎn)得不好，不能平均掉不均勻性，也可能容易斷裂等等。
 

　　根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，如核磁管質(zhì)量不好，經(jīng)所述高溫烘干處理很容易造成碎管。建議清洗方法：以丙酮“甩手法”，在50-60℃下烘5-6小時(shí)。
 

　　自然放置揮發(fā)些乙醇后，在70-80℃烘。帽子是不能烘的。但是對于不同的體系，要用不同的溶劑:不一定都要用丙酮，有時(shí)丙酮的溶解性并不好。有一點(diǎn)可以肯定：在洗凈后進(jìn)烘箱烘干前,用丙酮再清洗一次，干燥時(shí)間會(huì)縮短很多。
 

　　配制高質(zhì)量的樣品溶液是得到理想核磁數(shù)據(jù)的前提條件。下面介紹配置高質(zhì)量樣品的一些基本原則。
 

　　1、核磁樣品管的選擇
 

　　盡可能選擇經(jīng)濟(jì)承受范圍以內(nèi)的較高質(zhì)量核磁樣品管。樣品管的直徑與核磁核磁探頭的線圈直徑相匹配。除非沒有其他的選擇，不要把5mm的樣品管放在10mm的探頭里面。在任何情況下，不能使用比探頭線圈直徑大的樣品管。價(jià)格便宜的樣品管管壁厚度不一，這種不均勻性使得樣品在勻場過程中很難甚至不可能達(dá)到很好的狀態(tài)。同軸性、曲面、橫截面的不均勻性都限制了數(shù)據(jù)的質(zhì)量。
 

　　2、樣品的純度
 

　　樣品純度越高越好。核磁實(shí)驗(yàn)希望樣品有高的溶解度，但是樣品的純度高更好。如5mM高純度產(chǎn)物比20mM摻雜有其他異構(gòu)體或者中間反應(yīng)產(chǎn)物更好。為了采集到的13C信號更強(qiáng)，可以在做樣品提純之前先測試一維的碳譜。根據(jù)氫碳-HMQC/HSQC和HMBC圖譜結(jié)果能幫助區(qū)分出混合物中1D譜圖里的假峰。在機(jī)時(shí)緊張的情況下，很難保障提純后的樣品能夠得到信噪比足夠高的13C譜。也就是說，提純后低濃度的樣品花24個(gè)小時(shí)采集的一維碳譜有可能在我們希望能夠觀測到季碳化學(xué)位移的范圍內(nèi)只看到噪聲。掃描4天后雖然能夠加倍信噪比，但是在多用戶使用的條件下也是不可行的。因此如果我們只有少量的產(chǎn)品，可以通過二維技術(shù)，避免重復(fù)合成、分離、提純和樣品的準(zhǔn)備，在不用掃描一維13C譜的情況下，還是能夠*的指認(rèn)我們分子的1H和13C譜峰。
 

　　3、氘代溶劑的選擇
 

　　使用高質(zhì)量的氘代試劑。盡可能使用一次性的0.5到0.6毫升的小瓶試劑，而不是用容量為50或者100g的大包裝試劑。保存時(shí)間超過6個(gè)月會(huì)降解產(chǎn)生酸性，因此會(huì)交換溶質(zhì)分子中的不穩(wěn)定氫。如果溶質(zhì)分子包含有低的pKa的氫原子或者被酸催化會(huì)被降解時(shí)，必須要特別注意這一點(diǎn)。
 

　　4、干燥
 

　　烘干時(shí)，盡量平放在廚房用紙或者干凈的織物上面。不要豎直放在容器或者燒瓶中存放，不要把樣品管放在干燥箱中超過一分鐘。同心性和弧度非常高，壁厚和玻璃組成成分非常均勻。管壁越厚，玻璃管在平面上滾動(dòng)越快。如果直立在干燥箱的容器內(nèi)，地心引力會(huì)將核磁管彎曲，改變本來的弧度。如果平放太長時(shí)間，它們也會(huì)形成一段橢圓形的部分，因而同心性會(huì)變差。而薄的管壁比較容易破損。
 

　　5、樣品混合
 

　　如果樣品有限，并已經(jīng)樣品溶解到溶劑中，必須確認(rèn)溶液*混合。但是，在混合樣品時(shí)必須很小心，因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)高密度聚乙烯材質(zhì)的帽子可被常用的氘代核磁溶劑溶解。用振蕩器可以實(shí)現(xiàn)有效混合，但是也有例外。核磁核磁經(jīng)驗(yàn)豐富的人經(jīng)常用一只手輕輕的握住核磁管，用手指拍打來加速混合和溶解。有時(shí)可用細(xì)長巴斯德吸液管重復(fù)吸走再引入來加速混合。重水樣品在混合過程中容易產(chǎn)生氣泡，因此必須小心不要太用力的混合。
 

　　6、避免樣品的降解
 

　　在前面提到，使用一次性溶劑溶解樣品，盡可能阻止樣品發(fā)生化學(xué)反應(yīng)包括不穩(wěn)定的質(zhì)子交換。使用有機(jī)溶劑的時(shí)候，盡可能保持樣品無水，如在5mm樣品管的底部放入分子篩，保持分子篩邊緣處于樣品的檢測區(qū)域以外。
 

　　盡可能減少樣品暴露在氧氣和水蒸氣中的時(shí)間，方便的話在手套箱中準(zhǔn)備樣品。如果要保證核磁管內(nèi)的樣品處在惰性的環(huán)境中，可以先使用乳膠膜取代聚乙烯帽子密封我們的樣品管，然后使用插管透過乳膠膜將溶液倒入到樣品管中。但是乳膠膜隨著時(shí)間變長可滲透氧氣和水蒸氣。把另一個(gè)保護(hù)套套在核磁樣品管帽子上也會(huì)降低水蒸氣和氧氣進(jìn)入引起的降解。要意識到樣品管賣家在銷售時(shí)不會(huì)清洗樣品管。